Плотность эндотелиальных клеток роговицы

Плотность эндотелиальных клеток роговицы

Плотность эндотелиальных клеток роговицы

Передняя часть глазного яблока представлена роговицей. Существует множество заболеваний и состояний, которые меняют ее клеточный состав.

Чтобы их выявить, применяют эндотелиальную микроскопию роговицы глаза.

Это неинвазивная процедура, осуществляемая с помощью микроскопа последнего поколения. Главным его преимуществом является точность и отсутствие соприкосновения окуляра с поверхностными структурами глаз. На основе полученных данных можно поставить достоверный диагноз и начать лечение.

Показания к обследованию

Эндотелиальная микроскопия проводится не всегда, только по показаниям. Для этого у пациента должна появиться клиническая симптоматика:

  • помутнение, отек роговицы;
  • появление рубцов на роговице;
  • снижение остроты зрения;
  • изменение толщины роговицы;
  • нарушение рефракционной способности глаз, что приводит к миопии или близорукости.

Методику применяют для определения следующих заболеваний:

  • воспаление сосудистой оболочки глаза (увеит);
  • глаукома – повышение внутриглазного давления за счет притока секретируемой жидкости в камеры глаз;
  • дистрофия поверхностных структур глаз;
  • кератит – воспаление роговицы.

Процедуру рекомендовано проводить перед осуществлением хирургического вмешательства, чтобы выявить состояние поверхностных структур органов зрения. Если роговица истончена, клетки находятся далеко друг от друга, это прямое противопоказание к проведению хирургического вмешательства.

Методика также показана перед проведением трансплантации роговицы. При этом донор и реципиент должны совпадать по клеточному материалу пересаживаемой ткани.

Процедуру проводят для мониторинга за состоянием тканей после проведения хирургического вмешательства. С помощью микроскопии выявляется степень приживления клеток, качество роговицы после разреза.

Противопоказания

Процедура не относится к инвазивным. Она не причиняет боль, проводится очень быстро, поэтому ее можно применять даже к категориям пациентов, у которых наблюдается повышенная чувствительность глазных яблок. Время выполнения – несколько минут. Методика выполняется для людей разных возрастов, она возможна как для младенцев, так и для пожилых людей.

Единственное противопоказание к проведению процедуре – наличие лежачего больного. Аппарат действует только для людей в сидячем положении.

Данные могут быть некорректными или вовсе не выполнимыми при следующих состояниях:

  • сильное помутнение, рубцевание роговицы;
  • сильный отек роговицы.

Процедура полностью невыполнима, когда не определяются даже границы клеток, что образуется вследствие сильнейшего помутнения и изменения структуры эндотелия.

Что показывает эндотелиальная микроскопия

С помощью методики можно рассмотреть различные параметры поверхностного слоя роговицы:

  • плотность прилегания клеток друг к другу;
  • разница в размерах ближайших идентичных клеток;
  • количество клеток правильной и неправильной формы;
  • определение темных зон, которые проявляются после воспалительных состояний, после операционных вмешательств.

Методика позволяет изучить все эти показатели при жизни. То есть для проведения микроскопии не требуется извлечения кусочка ткани.

Как происходит обследование

Процедура проводится в несколько этапов:

  1. глаза и кожные поверхности должны быть чистыми, поэтому перед процедурой рекомендуется промыть эти области проточной водой или с помощью антисептических средств;
  2. человек садится перед микроскопом, на его глаза наводят окуляр;
  3. глаза должны быть открытыми в течение нескольких секунд, за это время происходит фотографирование различных зон роговицы.

Специфической подготовки к проведению процедуры не требуется.

Расшифровка результатов

Врач-лаборант выдает бланк, на котором записаны различные показатели строения роговицы. Его необходимо отнести к лечащему врачу, чтобы он произвел расшифровку, рассказал, нормальны ли результаты, назначил лечение. На бланке исследования будут обозначены следующие результаты:

  • плотность клеток эндотелия на 1мм2;
  • коэффициент полимегатизма клеток;
  • плеоморфизм (размер, строение, форма клеток, которая отличается или идентична нормальным клеточным элементам роговицы);
  • отсутствие просматривания эндотелия (темные зоны).

С помощью эндотелиальной микроскопии роговицы выявляются параметры, не доступные для определения невооруженным взглядом. До настоящего момента такие данные определялись только при биопсии, которая осуществлялась не при жизни, а после смерти пациента. С помощью методики можно подготовиться к операционному вмешательству, следить за состоянием пациента после его проведения.

Плохое зрение значительно ухудшает качество жизни, лишает возможности видеть мир таким, каким он есть. Не говоря о прогрессировании патологий и полной слепоте.

МНТК «Микрохирургии глаза» опубликовал статью о безоперационном восстановлении зрения до 90%, это стало возможно благодаря…

Читать полностью

Новинка!

Современное исследование глаз – эндотелиальная микроскопия роговицы – оценка состояния эндотелия роговицы глаз с применением микроскопа последнего поколения TOMEY EM4000 и цифровой обработкой данных.

Эндотелиальная микроскопия – это количественная и качественная оценка эндотелия – внутреннего слоя клеток роговицы (прозрачной выпуклой передней части глазного яблока). Для этого используют автомтизированный бесконтактный отражательный микроскоп последнего поколения TOMEY EM4000 и современный метод цифровой обработки данных.

Преимущества микроскопа TOMEY EM4000

  • Бесконтактные измерения;
  • Автофокусирование;
  • Быстрое и точное измерение – несколько секунд на обследование одного глаза;190-кратное оптическое увеличение;
  • Встроенная бесконтактная пахиметрия (измерение толщины роговицы);
  • Доступно измерение 13 зон роговицы – центральной, 6 парацентральных и 6 периферийных.

Что определяет аппаратура, встроенная в микроскоп?

  • плотность клеток эндотелия (количество клеток/мм²); у большинства людей с нормальной роговицей плотность клеток эндотелия как минимум 2000 кл/мм² и разница между двумя глазами менее 300 кл/мм²;
  • полимегатизм клеток (разница в размерах отдельных клеток) – этот показатель CV (коэффициент вариаций, норма=0,22-0,31); при CV больше 0,40 функция эндотелия все еще будет адекватная, но эндотелий подвержен более высокому риску повреждений при проведении интраокулярных операций, при появлении глаукомы, диабета или увеита, или если используются контактные линзы;
  • плеоморфизм клеток (морфология – оценка количества гексагональных клеток в процентах); идеальный эндотелий роговицы должен был бы полностью состоять из гексагональных (шестиугольной формы) клеток. Человеческая роговица в норме должна содержать ~60% гексагональных клеток;
  • автоматически определяет “темные” зоны; Темные точки в эндотелии появляются как в случае первичной эндотелиопатии, так и вторично – после интраокулярных операций, после воспаления глаз, глаукомы, применения контактных линз.

Когда рекомендуют делать эндотелиальную микроскопию?

  • Точная диагностика эндотелия может помочь определить не только причину изменений, но и планировать лечение часто встречающихся заболеваний глаз – глаукому, увеит, эндотелиальную дистрофию Фукса. Эти заболевания могут вызвать изменения в структуре и функциональности эндотелия, что в результате может вызвать отек роговицы и ухудшение зрения. Использование контактных линз и интраокулярные операциимогут вызывать изменения эндотелия и способствовать появлению отека в роговице;
  • Если запланирована операция катаракты;
  • Если у эндотелия пониженные качественные показатели, то хирург может планировать операцию катаракты таким образом, чтобы по возможности меньше травмировать роговицу во время операции. Перед операцией можно оценить риск возникновения отека роговицы и информировать пациента об этих рисках;
  • После операции – для оценки изменения состояния роговицы;
  • В рефракционной хирургии. При низкой плотности клеток эндотелия не рекомендуется коррекция зрения методом имплантирования интраокулярных линз (например, Artisan или ICL). После проведенной операции желательно следить за плотностью клеток, чтобы убедиться, что не происходит хроническое снижение плотности клеток, которое требует соответствующего лечения;
  • После операций по трансплантации роговицы. Регулярный контроль за состоянием эндотелия после трансплантации роговицы важный момент мониторинга трансплантированных тканей. Внезапное снижение плотности клеток после операции по трансплантации роговицы (кератопластики) может свидетельствовать о воспалительной реакции или о реакции иммунологического отторжения / апоптозе, который надо незамедлительно лечить. Плотность клеток после трансплантации также служит как прогностический показатель долговременной выживаемости трансплантата;
  • В хирургии глаукомы. После операции глаукомы, особенно с имплантацией фильтрующего элемента, также может произойти декомпенсация роговицы. Клетки эндотелия могут быть повреждены как от самого контакта импланта с роговицей, так и в результате иммунной реакции.

Полезная информация или когда можно/нельзя проводить эндотелиальную микроскопию с помощью TOMEY EM4000

  • Для проведения измерений нет возрастного ограничения. Это можно делать даже маленьким детям;
  • Оборудование проводит измерение очень быстро и безболезненно. Во время процесса нет никакого неприятного ощущения, не требуется длительно оставаться в каком-то вынужденном положении. Во время обследования пациент сидит у аппарата и опирается подбородком на специальную полочку;
  • Аппарат стационарный, поэтому невозможно выполнить измерение лежачим пациентам;
  • Измерение может не получиться если имеется большой отек роговицы или обширное рубцевание с помутнением роговицы, а также, если повреждение эндотелия настолько значительное, что границы клеток вообще невозможно определить.

Источник

19.09.2014, 23:18
Новичок

Источник: https://mir-ua.ru/plotnost-jendotelialnyh-kletok-rogovicy/

Опыт применения консервированного трансплантата роговицы при сквозной кератопластике

Плотность эндотелиальных клеток роговицы

Заболевания роговицы занимают одно из ведущих мест среди причин слабовидения и слепоты.

При формировании перфораций или «расплавлении» роговицы различного генеза единственным эффективным методом вернуть прозрачность, а значит и зрение, в ряде случаев – сохранить глаз, как орган, является трансплантация роговицы.

Так как применение нативной роговицы ограничено сроком жизни материала и ограниченной его доступностью, целесообразно применять запатентованные консервированные трансплантаты роговицы, особенно при необходимости неотложного хирургического вмешательства.

Проведен анализ 26 сквозных кератопластик, среди которых одну группу (22 глаза) составляли плановые операции, а вторую группу (4 глаза) – ургентные вмешательства. Срок наблюдения составил 24 месяца.

Все пациенты обследовались по стандартной методике, дополнительно производился подсчет эндотелиальных клеток. Прозрачное приживление достигнуто на 18 глазах (81%) в первой группе пациентов и на 3 глазах (75%) во второй группе.

Плотность эндотелиальных клеток составила 1500±200/мм2 (24 мес.).

Консервированная роговица является безопасным в отношении инфекций тканевым препаратом.

Роговица выполняет защитную и опорную функции, что обеспечивается её прочностью, чувствительностью и способностью быстро восстанавливаться. Функции светопроведения и светопреломления обеспечиваются прозрачностью и сферичностью роговицы.

Строма роговицы состоит из кератоцитов, которые активно синтезируют коллаген разных типов (I, V, VI) и кератансульфат. К моменту рождения число пролиферирующих кератоцитов падает практически до нуля, что знаменует их переход в G0фазу клеточного цикла[1].

В здоровой роговице запрограммированная клеточная смерть кератоцитов почти не наблюдается, однако сразу после повреждения наружнего её слоя (эпителия) наблюдается немедленный апоптоз кератоцитов, расположенных под зоной повреждения[2]. Кератоциты играют роль в патогенезе различных форм дистрофии роговицы.

Так, при генетическом нарушении синтеза кератансульфата, выделяемого в толщу стромы, развивается пятнистая дистрофия роговицы[3]; кератоконус обусловлен избыточным апоптозом кератоцитов[4], а нарушение функции «заднего» эпителия приводит к дистрофии Фукса[5].

Часто нарушение функции происходит в результате вторичной дистрофии роговицы, возникшей после хирургических вмешательств или травматических повреждений. Воспалительные процессы, приводящие к перфорации роговицы, нередко ведут к потере зрения[6].

По данным ВОЗ на сегодняшний день роговичная слепота занимает третье место среди причин слабовидения[7]. Около 8 млн человек в мире нуждаются в кератопластике, которая является основным и единственным методом лечения первичных дистрофий роговицы, а тем более, торпидных гнойных процессов.

В настоящее время, в качестве материала для трансплантации может быть использована только роговица человека. При сквозной кератопластике (СКП) трансплантат содержит все слои роговицы.

Среди них имеется слой очень чувствительных клеток – это «задний» нейроглиальный эпителий роговицы («эндотелий»* роговицы). Известно, что плотность «эндотелиальных» клеток меняется на всем протяжении жизни, но с разной динамикой.

При рождении плотность клеток составляет 3500–5000 кл./мм2.

В первый год жизни плотность эндотелиальных клеток снижается преимущественно за счет роста роговицы, далее плотность клеток снижается за счет уменьшения их числа. Естественная потеря этих клеток в среднем составляет 0,6% (0,3–1,0%) в год до возраста 14 лет, после чего их потеря становится более интенсивной – 2,9% в год.

К зрелому возрасту количество «эндотелиальных» клеток роговицы составляет 1400–2500 кл./мм2. Кроме возрастной потери, их количество снижается в результате травм, хирургических вмешательств, системных заболеваний (например, при сахарном диабете), поскольку при любом виде повреждения их регенерационный потенциал минимален[8].

После сквозной кератопластики все структуры донорской роговицы постепенно замещаются тканями роговицы реципиента, кроме клеток «заднего» эпителия, которые продолжают жить, поддерживая жизнеспособность трансплантата.

Этим объясняются высокие требования к качеству донорского материала для сквозной кератопластики и максимальная осторожность по отношению к задней поверхности роговицы при всех манипуляциях во время операции.

Необходимо отметить, что роговица, в отличие от других структур, подлежащих трансплантации, не имеет сосудов и отделена от сосудистого тракта глаза внутриглазной жидкостью. Этим объясняется относительная иммунная обособленность роговицы, позволяющая успешно выполнять кератопластику без строгого подбора пары донор-реципиент.

Использование нативной роговицы в качестве трансплантата ограничено сроком в 1 сут. после смерти донора. Поэтому большинство крупных офтальмологических клиник Европы, Азии и Америки пользуются услугами глазных банков. Функциями глазного банка являются забор, консервация и контроль за хранением донорского материала в соответствии с требованиями существующего законодательства.

Донорский материал консервируется в специальных жидкостях, содержащих в своем составе антибиотики, буферные соединения и др. При консервировании в специальной среде снижаются иммунные свойства роговицы, стабилизируются клетки «эндотелия» роговицы.

Плотность «эндотелиальных клеток» консервированной роговицы стандартно составляет не менее 2500/мм2, а срок хра- нения трансплантата – 14 сут.

Материал и методы

В ГАУЗ «РКОБ МЗ РТ» за период 2012–2014 гг. произведено 26 сквозных кератопластик (СКП) с использованием консервированного в среде EUSOL-C трансплантата роговицы (ООО «Имрог», Москва). Выкраивание трансплантата производилось одноразовыми трепанами фирмы Baron диаметром от 6,5 до 9,0 мм.

После обработки операционного поля раствором бетадина 5%, субтеноновой анестезии раствором лидокаина 2% и подшивания кольца Флиринга, одноразовым трепаном выкраивали сегмент роговицы диаметром на 0,5 мм меньше донорского сегмента. Трансплантат фиксировали 4 узловыми швами 8/0, затем ушивали непрерывным швом 10/0. Передняя камера восстановлена воздухом.

В послеоперационном периоде использовались кортикостероиды мест- но, сроком до 1 года по убывающей схеме.

Одной группе пациентов выполнялась плановая СКП. В эту группу входило 22 человека (22 глаза) – 13 мужчин и 9 женщин в возрасте 27–84 лет. Нозологическая структура пациентов первой группы пред- ставлена в таблице 1.

У пяти пациентов основное заболевание было осложнено глаукомой – на 2 глазах внутриглазное давление компенсировано медикаментозно, на 3 глазах предварительно имплантирован клапан Аchmed. Также одномоментно с СКП в 3 случаях произведена экстракция катаракты по типу «открытое небо» с имплантацией интраокулярной линзы (ИОЛ) и на 2 глазах произведена замена переднекамерной ИОЛ на заднекамерную.

Послеоперационный период у пациентов этой группы протекал без особенностей, за исключением двух случаев, когда развилась картина увеита. Применением массивных доз глюкокортикостероидов явления воспаления были купированы.

Второй группе пациентов выполняли ургентную СКП. Эту группу составили 4 человека (4 глаза), все пациенты мужского пола в возрасте 23–64 года. Нозологическая структура пациентов представлена в таблице 2.

Техника операции у двух пациентов отличалась несколько асимметричным высеканием трансплантата реципиента из-за локализации воспалительного процесса (рис. 4А, Б) и большим диаметром трансплантата. В послеоперационном периоде в двух случаях произошла ранняя кератомаляция, вследствие чего этим пациентам была произведена блефарорафия.

Подсчет клеток «эндотелия» роговицы производился анализатором TomeyEM-3000. Технические возможности прибора позволяют осуществить захват «эндотелиальных» клеток роговицы глаза, анализ захваченного изображения и расчет клеточной плотности в автоматическом режиме.

Измерения выполняются без непосредственного контакта с по- верхностью роговицы глаза пациента.

Результаты

Анализ результатов лечения проводился по состоянию роговичного трансплантата (биологический результат) и остроте зрения (функциональный результат).

Биологический результат кератопластики оценивали по состоянию пересаженного трансплантата: прозрачный, полупрозрачный и мутный.

Функциональный исход операции зависит не только от степени прозрачности трансплантата, но и от со- хранности зрительно-нервного аппарата глаза.

В первой группе пациентов, которым была проведена плановая СКП, прозрачное (см. рис. 1) и полупрозрачное (см. рис. 2, 3) приживление наблюдалось на 18 глазах (81%). Максимальная острота зрения в этой группе составила от 0,04 до 0,4 (0,2±0,08) с коррекцией.

Низкая острота зрения объясняется некорригируемым послеоперационным астигматизмом, а также глаукомой или изменениями в макуле, которые предшествовали трансплантации. Плотность «эндотелиальных» клеток после трансплантации составила 1500±200/мм2. ВГД на всех глазах, в т. ч. у пациентов с глаукомой компенсировано.

Мутное приживление наблюдалось на 4 глазах (19%). Острота зрения у этих пациентов составляла от правильной светопроекции до движения руки у лица.

Во второй группе пациентов после ургентной СКП прозрачное и полупрозрачное приживление наблюдалось на 3 глазах (75%) (см. рис. 4Б, 5Б, 6Б), в том числе у одного из пациентов после ранней кератомаляции и блефарорафии. В этом случае через 6 мес. после блефарорафии наблюдали восстановление целостности роговицы.

Максимальная острота зрения у этих пациентов не превышала 0,08±0,02 из-за асимметрично-расположенного лоскута и соответственно астигматизма высокой степени.

На 1 глазу (25%) в течение всего срока наблюдения имеет место постоянная частичная блефарорафия из-за кератомаляции и развитию синдрома сухого глаза тяжелой степени.

Таким образом, консервированный трансплантат роговицы безопасен в отношении различных инфекций и имеет пригодную для сквозной кератопластики плотность «эндотелиальных» клеток.

Источник: https://genescells.ru/article/opyit-primeneniya-konservirovannogo-transplantata-rogovitsyi-pri-skvoznoy-keratoplastike/

Эндотелиальная микроскопия роговицы глаза

Плотность эндотелиальных клеток роговицы

Передняя часть глазного яблока представлена роговицей. Существует множество заболеваний и состояний, которые меняют ее клеточный состав.

Чтобы их выявить, применяют эндотелиальную микроскопию роговицы глаза.

Это неинвазивная процедура, осуществляемая с помощью микроскопа последнего поколения. Главным его преимуществом является точность и отсутствие соприкосновения окуляра с поверхностными структурами глаз. На основе полученных данных можно поставить достоверный диагноз и начать лечение.

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.